Quinta stagione.
Il noto Conte Dracula si reca a Sunnydale per conoscere la famosa Cacciatrice. Buffy subisce il suo fascino, attratta dalla promessa del vampiro di darle informazioni sulla natura delle cacciatrici, tuttavia riesce a sconfiggerlo (ma non ad ucciderlo nonostante venisse impalettato più volte). Al rientro a casa fa la sua prima apparizione Dawn Summers, ovvero la sorella di Buffy. A parte un'eccezionale citazione in "La ragazza dell'anno" (4x15), la sua comparsa non viene inizialmente spiegata lasciando sbigottiti i telespettatori. Spike si trasferisce in una cripta di un cimitero e riprende la relazione con Harmony: assieme rapiscono un medico e lo costringono a cercare di rimuovere il microchip che l'Organizzazione gli ha innestato nel cervello ma il piano viene sventato da Buffy. Ritornato nella sua cripta, Spike sogna di baciare la Cacciatrice e, svegliandosi di soprassalto capisce di essersene innamorato. Nel frattempo Buffy deve affrontare i problemi di Riley, che soffre di crisi di astinenza dai farmaci che gli somministrava l'Organizzazione, e le frequenti emicranie di sua madre Joyce. Convinta che il malessere della madre sia di origine magica, Buffy la sottopone ad un incantesimo da cui emerge soltanto la strana duplice realtà che ruota attorno a Dawn. Viene a questo punto rivelata la vera natura della sorella: un misto di energia e luce convertito dai monaci in un essere umano creato dal sangue di Buffy e chiamato «La Chiave», un mezzo per aprire un portale intradimensionale, tanto bramato da Glory, un malvagio dio ultraterreno scacciato dal suo universo e confinato in un corpo umano di nome Ben, costantemente alla disperata ricerca di un modo per ritornare nella sua dimensione. I monaci, oltre a creare il corpo, hanno riempito Dawn di ricordi fasulli sulla sua infanzia, così come per tutti gli altri che si comportano come se l'avessero sempre conosciuta. Dopo averlo frequentato numerose volte come cliente, Giles diventa proprietario del negozio di magia "Magic Box" e trasferisce li la sede della Scooby-Gang. Glory si nutre dell'essenza vitale degli uomini e dopo averli prosciugati li riduce a semi-incoscienti che vengono scambiati per malati mentali. Anche in queste condizioni, tuttavia, riescono a riconoscere la Chiave e, dall'incontro con uno di loro, Dawn inizia ad insospettirsi. Aiutata da Spike, che cerca in tutti i modi di attirare l'attenzione di Buffy, Dawn inizia a fare delle ricerche e alla fine scopre da sola la verità rimanendone sconvolta. Riley non riesce ad adattarsi alla vita da civile né riesce ad accettare il fatto che Buffy abbia amato un vampiro, Angel, e subìto il fascino di un altro, Dracula: comincia a frequentare allora locali popolati di vampiri e si fa mordere leggermente per provare la sensazione ma viene scoperto da Spike che, per gelosia nei suoi confronti e innamorato di Buffy, lo smaschera davanti alla Cacciatrice. La loro storia d'amore finisce e Riley rientra nell'Organizzazione lasciando Sunnydale. Contemporaneamente un'altra grave sciagura si abbatte su Buffy: la madre, che dopo un'operazione per rimuovere un tumore al cervello sembrava ristabilita, muore improvvisamente a causa di un aneurisma cerebrale. Buffy e Dawn sono ora sole e devono farsi forza a vicenda anche se sono aiutate dagli altri membri del gruppo. Spike cerca di approfittare dello sconforto di Buffy per starle vicino ma quando a Sunnydale ricompare Drusilla, nel frattempo sconfitta e quasi bruciata da Angel a Los Angeles, deve fare i conti con il proprio passato: catturate tutte le donne della sua vita, Spike offre a Buffy di sacrificare Drusilla e Harmony per dimostrarle il suo amore ma ottiene solo il disprezzo della cacciatrice che lo respinge sdegnata e perde per sempre anche Drusilla. Harmony fugge schifata e si reca a Los Angeles dove avrà a che fare con Angel e Cordelia. Non potendo consolarsi con la vera Buffy, Spike si fa costruire un robot a sua somiglianza da Warren, uno geniale studente di ingegneria che dopo essere stato lasciato dalla sua fidanzata Katrina si era costruito una donna-robot ideale. Mentre Buffy e Giles partono per una missione mistica e rievocano lo spirito della prima cacciatrice per avere risposte sul da farsi, Il Buffy-robot è motivo di sorpresa ed imbarazzo fra gli altri membri del gruppo che non lo distinguono dalla vera cacciatrice. Ben si lascia sfuggire ad uno degli scagnozzi di Glory che la chiave è un essere umano e questa si convince che deve trattarsi di una persona molto vicino a Buffy. Il primo ad essere catturato da Glory è Spike poiché gli scagnozzi lo hanno visto fare l'amore con il Buffy-robot. Dopo essere stato torturato a sangue, Spike viene liberato da Buffy ma privato per sempre del suo robot. Glory, a questo punto, indirizza le sue attenzioni su Tara ma dopo aver capito che nemmeno lei è la chiave la rende una minorata mentale come tanti altri con grande disperazione di Willow. Tuttavia sarà proprio Tara ad indicare a Glory che la chiave che sta cercando con tanta determinazione è Dawn: Buffy e tutto il gruppo, compreso Spike, sono costretti allora a fuggire e vengono inseguiti dai cavalieri di Bisanzio, un antico ordine guerriero che conosce la verità su Glory e la chiave e pensa che la soluzione migliore sia uccidere Dawn. Durante la fuga, Giles viene gravemente ferito e Buffy chiama l'unico medico che conosce: Ben. Egli non riesce ad evitare di trasformarsi in Glory, la quale rapisce facilmente Dawn e stermina tutti i componenti dell'ordine di Bisanzio. Mentre iniziano i preparativi per il rituale di dissanguamento di Dawn necessario per aprire il portale che ricondurrebbe Glory nella sua dimensione, Buffy ed il gruppo si riorganizzano e penetrano nel palazzo di Glory: gli scagnozzi vengono sconfitti dal gruppo, Glory viene pesantemente debilitata da Buffy con l'aiuto del Buffy-robot e di alcune armi magiche. Ciò permette a Willow di ripristinare la mente di Tara e Glory, resa così ancora più debole,si ritrasforma in Ben, cioè la parte umana che può essere facilmente uccisa. Giles non si fa alcun scrupolo nel farlo morire soffocato, tuttavia un servitore di Glory, Doc, ha nel frattempo ferito Dawn ed attivato il processo di apertura del portale. L'unico modo per arrestarlo è interrompere il corso di sangue umano che l'ha innestato e per far ciò servirebbe il sacrificio di Dawn ma per Buffy trovano finalmente senso le parole pronunciate dallo spirito della Cacciatrice Primordiale: "la morte è il tuo dono". Dato che lei e Dawn hanno lo stesso sangue (poiché i monaci hanno creato la sorella proprio dal suo sangue), Buffy decide di sacrificare la sua vita gettandosi nel portale che, così facendo, si chiude salvando il mondo. La serie si chiude con le parole che Buffy rivolge ai suoi compagni: "Restate accanto l'uno all'altro e vivete, vivete per me".